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按這個步驟操作植物ELISA試劑盒,既簡單又安全

更新時間:2023-05-08      瀏覽次數(shù):454

植物elisa試劑盒檢測中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,例如規(guī)定為加樣一滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結合物的稀釋液應按規(guī)定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。

 

  樣本處理:

  1、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

  3、細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

  5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

  

  植物elisa試劑盒檢測的操作步驟:

  1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃

  2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

  3、樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加;

  4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min;

  5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次;

  6、每孔加入底物A、B50μL,37℃避光孵育15min

  7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

 


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