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2023-09-05產(chǎn)品中心/ products
大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)是一種基于多孔板的免疫測(cè)定法,將通常作為檢測(cè)成分之一的抗體或樣品吸附在固體表面(此方法采多孔板)。ELISA以相對(duì)低廉的成本,快速、定量且靈敏地檢測(cè)分析物,是最簡(jiǎn)dan的分析方法之一。此外,ELISA還可輕松改造為更高通量篩選方法,幫助研究人員通過單次運(yùn)行檢測(cè)大量樣品。
聯(lián)系電話:0755-28019324
品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | RQ-FS1625A |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 96T/48T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研試驗(yàn) | 品牌 | 瑞清 |
方法 | 競(jìng)爭(zhēng)法、夾心法、間接法 | 檢測(cè)樣本 | 血清.血漿.組織.相關(guān)液體等 |
檢測(cè)種屬 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動(dòng)植物 | 售后 | 專屬服務(wù) |
大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒 |
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 。往預(yù)先包被病毒性腹瀉病毒抗ti的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在suan的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450NM波長下測(cè)定吸光度(OD值) ,與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬病毒性腹瀉病毒(BVDV) 的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.細(xì)胞上清液: 3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn) 離心10分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20°C, 避免反
復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標(biāo)儀(450NM)
2.高精度加樣器及槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1.試劑盒保存在2-8°C,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完quan溶解后再使用。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預(yù)處理后的樣本請(qǐng)按照操作步驟用樣ben稀釋ye適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的的最jia檢測(cè)效果。.
4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒
常用方法:
1. 夾心法:
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般的操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)
c. 洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗ti,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)
d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗ti,加入帶有酶的二次抗ti,與一次抗ti鍵結(jié)
e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果
原理:針對(duì)抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標(biāo)抗ti,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。
2. 間接法
間接法常用于檢測(cè)抗ti,一般的操作步驟為:
a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
b. 加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗ti,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。
c. 洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗ti,與待測(cè)的一次抗ti鍵結(jié)。
d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗ti的含量。
原理:利用酶標(biāo)記的抗抗ti以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗ti。
3. 競(jìng)爭(zhēng)法
競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)
c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗ti數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗ti就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤上抗ti鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來。
d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。
e. 當(dāng)需要偵測(cè)無法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原,或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤上時(shí),一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。
標(biāo)本要求 :
1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控
制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于
標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍) 后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)
后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
訂購說明:
※關(guān)于產(chǎn)品售價(jià),由于市場(chǎng)的不穩(wěn)定性,價(jià)格變動(dòng)是必然的,但是我們可以提供當(dāng)下公允的市場(chǎng)價(jià)格,批量訂購還可享受相應(yīng)的優(yōu)惠活動(dòng);
※關(guān)于產(chǎn)品的具體信息,本頁面展示的內(nèi)容僅供參考,而詳細(xì)的產(chǎn)品信息,可以咨詢我們;
※關(guān)于運(yùn)費(fèi)問題,批量訂購可免郵,本品采用低溫箱冷凍保存;
※關(guān)于服務(wù),我們提供完整的售前售后服務(wù),并貫穿你的整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程,如遇技術(shù)問題,可隨時(shí)聯(lián)系我們,我們真誠地為您答疑解惑。
山羊胰島素(INS)ELISA試劑盒
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